moc 1/moc 2マウス口腔鱗状細胞癌/雌

基本情報

細胞名：moc 1/moc 2マウス口腔鱗状細胞癌

細胞系統：C57BL/6 Cxcr3-/-

細胞由来：海外

細胞同定：STR検定に合格しました

細胞形態：リンパ母多角形細胞様、壁貼り+懸濁成長

培地：DMEM（NaHCO 3を含む1.5 g/L）（BasMed-AW-013）+FBS 10%+P/S 1%500 ML培地：IMDM：F 10/F 12=2：1313 ml：157 ml培地+FBS 10%（50 ml）+2.5 mg/500 mlインスリン+20 ug/500 ml+2.5 ug/500 ml EGF+P/S 1%双抗、1%。

培養条件：気相：空気、95%二酸化炭素、5%。温度：37℃、培養箱の湿度は70～80%

細胞の背景：口腔うろこ状細胞癌（OSCC）は頭頸癌の突出部分集合であり、頭頸癌は六大一般癌である。OSCC発生の主な危険因子は発癌物質の暴露であり、頭頸癌のこの亜群とヒト腫瘍ウイルス誘導の頭頸癌を区別する。検査、手術、化学療法、放射線治療の面で進展があったにもかかわらず、OSCCの予後は数十年にわたって安定していた。また、診断時には、OSCC患者の約3分の2が局所末期疾患を患っており、発病率と死亡率の増加を招いている。

細胞用途：科学研究用のみ

注意事項

1.MOC 1細胞は特に活性が高く、増殖速度が非常に速く、継代密度が大きすぎることを提案せず、薄い重舗装を選択し、80%前後の継代が成長すると、消化が難しくなり、0.25%EDTAを加えた後、すべての細胞を十分に混合して接触させ、培養箱に置いて消化することを提案し、時間は約3-4分程度後に取り出す

2.培養器の側で拍打を行って細胞の脱落を助け、拍打過程は約2分程度続いてからほとんどの細胞が脱落し、脱落割合がまだ多くない場合は、培養箱に戻して1-2分消化を続けた後に再び取り出して拍打脱落を行い、80-90%の細胞が脱落してから消化を中止し、遠心分離して再び瓶を敷き、均一に分散することができる。

3.MOC 2細胞の壁貼り性と通常の細胞の類似は特に強固ではない。増倍周期もMOC 1ほど速くはありません。通常の消化方法で処理する。

常温出荷

受け取ったT 25本を消毒してから培養箱を2-3時間静置した後、密度と状態を観察して2-3枚を撮影して販売にフィードバックし、密度が基準を達成すれば継代することができる。前期継代比1：2、再次長が後継代に満杯になると、1本を1個の1 mlの凍結保存管に凍結保存することを提案し、もう1本は継代を続け、2-3本を繰り返し凍結保存してから実験を拡大し、突発的な状況による断種を防止する。

ドライアイス出荷通常の細胞は凍結保存管2本、蘇生1本、もう1本は予備として出荷され、最初の蘇生が成功しなかった場合はメーカーの要求に厳格に従って2本目を蘇生し、いずれも蘇生に成功しなかった場合は即時に蘇生写真を残して知らせてくれた。

壁細胞

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.0.25%（w/v）-0.53 mM EDTAを培養瓶に入れ（T 25瓶1-2 mL、T 75瓶2-3 mL）、37℃培養箱に置いて1-2分間消化し（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、もし細胞の大部分が丸くなって脱落したら、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、3-4 mlの10%FBS含有培地を加えて消化を終了する。

3.軽く均等にしてから吸引し、1000 RPM条件下で3-5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mLの培養液を補充してから均等に吹き付ける。細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25本/6 cmシャーレに分け、説明書の要求に従って配置された新しい培地を6-8 ml添加して細胞の成長活力を維持し、その後の継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:5の割合で行った。

4.細胞凍結保存：細胞を受け取った後、培養前3世代の時に細胞種子を凍結保存して、後続の実験使用に備えることを提案する。

5.輸送用の培地（灌液培地）は細胞の培養には使用できません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製された培地と交換して細胞を培養してください。

懸濁細胞

懸濁状態で成長した細胞は、培養瓶に培地を添加することで細胞の成長状態を維持することができ、一般的には細胞密度を1×10タリウム~ 1×10タリウム/mL（異なる細胞は密度に対する要求が異なる）に維持することで細胞の正常な成長を維持することができる。フラスコが必要ならば、細胞懸濁液を遠心管中の1000 rpm、5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、再懸濁混和した後、細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25フラスコに分け、6-8 mlを明細書の要求に従って配置した新しい培地を添加して細胞の成長活力を維持し、後続継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:4の割合で行う。

バイオセーフティ

1.すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があると見なし、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、保護に注意して、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから捨てることができる必要がある。

2.凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。