HEP-53.4マウス肝癌細胞

基本情報

細胞名：HEP-53.4マウス肝癌細胞

細胞別名：HEP-53.4 ; 53.4 ;マウス肝癌細胞

細胞由来：ドイツ

細胞同定：STR検定に合格しました

細胞形態：上皮様細胞、壁貼り成長

培養基：DMEM（NaHCO 3を含む1.5 g/L）（BasMed-AW-013）＋FBS 10%＋P/S 1%

培養条件：気相：空気、95%二酸化炭素、5%。温度：37℃、培養箱の湿度は70～80%

とうけつじょうけん：無血清凍結貯留液、液体窒素貯留

細胞の背景：C 57 BL/6 Jマウスの原発性肝細胞癌に由来し、これらのマウス肝細胞は肝細胞癌を忠実に代表し、そしてこのタイプの肝癌を研究するために価値のあるモデル、類義語HEP-53.4と53.4を提供し、それらは識別と交差引用に便利で、肝細胞癌は重大な健康問題であり、これらの細胞はその分子通路、細胞相互作用と治療戦略に対して精確な研究を行うことができ、これらの細胞はMusmusculus（マウス）に起源し、肝細胞癌の治療方法を理解し開発するために関連するモデルシステムを提供した。

細胞の用途：科学研究用のみ

細胞納期：現物、1週間程度

注意事項

1.通常の消化収集細胞の遠心分離。

2.遠心分離後、遠心管内上澄みを取り除き、1 ml程度の重懸濁細胞を加えて混和させ、細胞を軽く揺らすか軽く吹き、培養箱に入れて細胞を消化し、さらに1 min程度消化することを提案する。

3.消化が終わったら、ピペット銃で細胞懸濁液を軽く吹き付け、細胞団を分散させ、血清を含む培地を迅速に3-5 ml加えて混和して消化を中止し、遠心分離した。

4.細胞に対応する培地を5 ml程度加えてホモジナイズし、フラスコ/皿に比例して入れた。

5.顕微鏡下で細胞が均一に分散した単細胞になっているかどうかを観察し、少量の塊の小細胞団があれば再消化せずに壁に貼り付けてから細胞の成長が安定してから細胞を消散させることができる。

常温出荷

受け取ったT 25本を消毒してから培養箱を2-3時間静置した後、密度と状態を観察して2-3枚を撮影して販売にフィードバックし、密度が基準を達成すれば継代することができる。前期継代比1：2、再次長が後継代に満杯になると、1本を1個の1 mlの凍結保存管に凍結保存することを提案し、もう1本は継代を続け、2-3本を繰り返し凍結保存してから実験を拡大し、突発的な状況による断種を防止する。

ドライアイス出荷通常の細胞は凍結保存管2本、蘇生1本、もう1本は予備として出荷され、最初の蘇生が成功しなかった場合はメーカーの要求に厳格に従って2本目を蘇生し、いずれも蘇生に成功しなかった場合は即時に蘇生写真を残して知らせてくれた。

HEP-53.4マウス肝癌細胞

壁細胞

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.0.25%（w/v）0.53 mM EDTAを培養瓶に添加し（T 25瓶1-2 mL、T 75瓶2-3 mL）、37℃培養箱に置いて1-2分間消化し（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、もし細胞の大部分が丸くなって脱落したら、迅速に操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、3-4 mlの10%FBS含有培地を添加して消化を中止する。

3.軽く均等にしてから吸引し、1000 RPM条件下で3-5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mLの培養液を補充してから均等に吹き付ける。細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25本/6 cmシャーレに分け、説明書の要求に従って配置された新しい培地を6-8 ml添加して細胞の成長活力を維持し、その後の継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:5の割合で行った。

4.細胞凍結保存：細胞を受け取った後、培養前3世代の時に細胞種子を凍結保存して、後続の実験使用に備えることを提案する。

5.輸送用の培地（灌液培地）は細胞の培養には使用できません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製された培地と交換して細胞を培養してください。

懸濁細胞

懸濁状態で成長した細胞は、培養瓶に培地を添加することで細胞の成長状態を維持することができ、一般的には細胞密度を1×10タリウム~ 1×10タリウム/mL（異なる細胞は密度に対する要求が異なる）に維持することで細胞の正常な成長を維持することができる。フラスコが必要ならば、細胞懸濁液を遠心管中の1000 rpm、5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、再懸濁混和した後、細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25フラスコに分け、6-8 mlを明細書の要求に従って配置した新しい培地を添加して細胞の成長活力を維持し、後続継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:4の割合で行う。

ゆそうけいしき

低温：1 mL凍結保存管包装ドライアイス輸送、受け取った後-80度冷蔵庫で一晩保存した後、液体窒素に転入するか、直接回復し、もしドライアイスが揮発してきれいになり、凍結保存管のキャップが脱落し、破損し、細胞に汚染があることを発見したら、すぐに私たちに連絡してください。

常温：T 25本で回復した生存細胞を常温出荷し、受け取った後は細胞受信後の処理方法に従って操作する。

バイオセーフティ

1.すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があると見なし、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、保護に注意して、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから捨てることができる必要がある。

2.凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。

特に注意する

この細胞はDMEM（1.5 g/LNaHCO 3を含む）培地でよく成長し、大部分のDMEMは高濃度のNaHCO 3（3.7 g/L）を含有し、DMEM（3.7 g/L NaHCO 3）培地を用いて細胞を培養する場合、CO 2濃度（7〜10%）を高める必要がある。