ヒト肺微小血管内皮細胞

一、細胞基本属性

細胞名：ヒト肺微小血管内皮細胞

組織由来：肺組織

種属源：人

製品規格：5×105 cells/T 25細胞培養ボトル

細胞の概要：ヒト肺微小血管内皮細胞肺組織から分離する、肺は機体の呼吸器官で、胸腔に位置し、左右1つずつ、心の上に覆われている。肺には分葉、左二右三、計五葉がある。肺経肺系（気管支、気管支などを指す）は喉、鼻とつながっているので、喉を肺のポータルと呼び、鼻を肺以外のコツと呼ぶ。微小血管内皮細胞は再生、発育、創傷癒合など一連の生理及び炎症反応に密接に関与している。細胞は糸状または多角形を呈し、単層を形成した後に玉石様または舗装石様の配列を呈した。肺微小血管内皮細胞は半選択性障壁を構成し、この障壁は肺ガス交換に対して、血液と肺間質の間の液体と可溶物の流動を調節することが重要な意義を持っている。

被覆条件：PLL（0.1 mg/ml）、ゼラチン（0.1%）

培地：FBS、成長添加剤、Penicillin、Streptomycinなどを含む

液交換頻度：2-3日ごとに液交換

成長特性：壁貼り

細胞形態：内皮細胞様

継代プロパティ：2～3世代までの継代が可能

継代スケール:1:2

消化液：0.25%

培養条件：気相：空気、95%、CO2，5%

二、使用方法：

ヒト肺微小血管内皮細胞壁貼り細胞であり、細胞形態は内皮細胞様であり、技術部の標準操作プロセスの下で、細胞は2-3世代伝えることができる、細胞を受け取ったら、できるだけ早く関連実験を行うことをお勧めします。

お客様は細胞を受け取ったら、次の方法で操作してください。

1.T 25細胞培養瓶を取り出し、75%アルコールで瓶体を消毒し、封口膜を取り外し、37℃、5%CO 2、飽和湿度の細胞培養箱に3-4時間静置し、細胞状態を安定させる。

2.壁貼り細胞の消化

1）T 25細胞培養ボトル中の培地を吸引し、PBSで細胞を1回洗浄する、

2）0.25%消化液1 mL〜T 25培養瓶に添加し、培養瓶を軽く回して消化液が培養瓶の底全体を覆った後、余分な消化液を吸引し、37℃で1〜3 min温浴する、逆置顕微鏡下で観察し、細胞が収縮して丸くなった後、5 mlの培地を加えて消化を停止した、

3）ストローで軽く吹き混ぜ、継代の割合でT 25培養瓶を接種して継代し、その後新鮮な培地を5 mLまで補充し、37℃、5%CO 2、飽和湿度の細胞培養箱に入れて静置培養する。

4）細胞を壁に貼り付けた後、培養観察、その後、液交換頻度に応じて新鮮な培地を交換した。

3.細胞受入脱落

1）すべての細胞懸濁液を収集し、1000 rpm、5分間遠心分離し、沈殿を保留する、

2）0.25%消化液0.5 mLを遠心管に添加し、再懸濁沈殿し、37℃で3 minを消化する（または4℃冷蔵庫で5-7 min静置）、消化が完了したら遠心管内に5 mlの培地を加えて消化を停止する、

3）1000 rpm、5 min遠心分離し、上清を捨て、5 ml培地で再懸濁沈殿し、新しい培養瓶に接種する。

4）細胞を壁に貼り付けた後、培養観察、その後、液交換頻度に応じて新鮮な培地を交換した（37℃予熱）。

5）原瓶内壁貼付細胞を正常消化処理する。

4.細胞実験

元世代細胞の壁貼りの特殊性のため、壁貼りの元世代細胞は消化後に他の実験容器（例えばガラス板、培養板、共焦点培養皿など）に移した場合、細胞貼りの壁貼り性を強化し、細胞がうまく貼られていないために実験に影響を与えないように実験容器を包む必要がある、被覆条件はよくマウスコラーゲンI（2-5μg/cm 2）、ポリウレタンPLL（0.1 mg/ml）、ゼラチン（0.1%）を選択し、細胞種に応じて決定した。懸濁／半懸濁細胞は被覆を必要としない。

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細胞培養の注意事項：

初代細胞培養に関する注意事項。初代細胞培養は非常に重要な実験技術であり、これらの注意事項をマスターすることで、あなたの実験をよりスムーズにすることができます。

まず、無菌操作が鍵です。細菌やカビ汚染を避けるために、操作環境を清潔にしなければならない。そうしないと実験は失敗する。

次に、適切な培地と血清を選ぶことも重要です。培地と血清に対する細胞のニーズは異なるので、細胞タイプに応じて適切な培地と血清を選択しなければならない。

また、細胞培養における成分でもある。新鮮に調製し、保存中も定期的に補充しなければならない。

細胞培養の過程では、静置培養も非常に重要である。細胞は消化分離後に新しい環境に適応するために一定の時間を必要とするので、この間に培養瓶を頻繁に取り出して観察することは避けなければならない。

また、消化時間も適切にコントロールしなければならない。通常、肉眼で微小組織粒子が見えるまで消化すればよく、長すぎる消化時間は細胞損傷を加重させ、細胞培養生存率に影響を与える。

最後に、いくつかの特殊なタイプの細胞に対して、細胞の成長と増殖を促進するためにいくつかの特殊な成長因子を追加する必要があるかもしれない。しかし、これらの成長因子の費用は一般的に高いことに注意しなければならない。