ヒト気管上皮細胞

ヒト気管上皮細胞

細胞の基本的な属性：

細胞の概要：ヒト気管上皮細胞気管組織から分離する、気管（Trachea）、呼吸器の一部、後壁がやや平らな円筒形管状である。上端は第6頸椎下縁を平らにし、環状軟骨とつながっている。下向きから第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）の境界に至るまで、左、右の主気管支に分けられ、分岐点は気管杈と呼ばれる。気管は主に14-16個の半環状軟骨から構成され、弾力性があり、軟骨は「C」字形の軟骨環であり、切欠きは後方にあり、各軟骨環は靭帯で連結され、環後方切欠き所は平滑筋と緻密結合組織で連結され、持続的な開状態を維持した。管腔は粘膜で裏打ちされ、表面は繊毛上皮を覆い、粘膜から分泌された粘液は空気中に吸い込まれたほこり粒子に付着し、繊毛は絶えず咽頭部に揺動して粘液とほこりを排出し、吸い込まれたガスを浄化する。気管上皮は気道と外界環境との接触の最初の防御線であり、各種病原体、炎症媒質作用の標的細胞だけでなく、効果細胞として多種の炎症媒質とサイトカインを合成、放出して気道炎症と免疫反応に関与する。体外培養の初代気管上皮細胞は体内組織と形態構造と機能活動に大きな類似性があるため、基礎及び臨床研究において極めて重要である。

被覆条件：ラットコラーゲンI（2-5μg/cm 2）

培地：FBS、成長添加剤、Penicillin、Streptomycinなどを含む

液交換頻度：2-3日ごとに液交換

消化液：0.25%

培養条件：気相：空気、95%、CO2，5%

初代細胞培養方法：

1.準備：消毒された各種培養用品を浄化台に置き、紫外線消毒を20分間行う。仕事を始める前に手を洗い、アルコール75%で手から肘まで拭きます。

2.レイアウト：アルコールランプを点火し、ストローキャップを取り付ける。

3.処理組織：組織塊をビーカーに入れ、ハンクス液で2 ~ 3回すすぎ、血汚れを除去する、組織の汚染の可能性が疑われる場合は、まず青を含む混合液中に30〜60分間置くことができる。

4.カット：組織を眼科用カットで2 ~ 3ミリの大きさに切り、消化しやすいようにする。組織塊の総量より30 ~ 50倍多い液を加え、三角フラスコに一緒に注ぎ、瓶の口や栓を結び付けて膠栓する。

5.消化：或いは恒温水浴を用いて、或いは37℃の温箱に置いて消化してもよく、消化中は20分ごとに揺動しなければならない、例えば電磁恒温攪拌器で消化するのがもっと良い。消化時間は組織塊の大きさと組織の硬度によって決まる。

6.分離：消化過程中に消化液が濁っているのを見た場合、ストローで消化液を少し吸引して鏡下で観察し、例えば組織が細胞団または単一細胞に分散し、直ちに消化を中止し、その後、適切なステンレスふるいを通過し、十分に消化されていない組織塊を濾過した。低速（500〜1000回転／分）で5分間遠心消化液を出し、上清を吸引し、適量の血清を含む培養液を加えた。

7.計数：細胞懸濁液の細胞密度が大きすぎる場合、計数板で計数し、培養液を補充して調整した後、培養瓶に分装する。ほとんどの細胞にとって、pHは7.2 ~ 7.4の範囲であることが要求され、培養液はやや赤色を呈し、例えば色が黄色く、液体が酸に変化することを示し、NaHCO 3で調整することができる。

8.培養：36.5℃の温度箱に置いて培養し、CO 2温度箱で培養する場合、瓶の蓋は半分緩めなければならない。

注意事項：

1.培養は4℃条件下で3〜6ヶ月保存できる。

2.細胞培養中、無菌操作を維持することに注意してください。

3.継代培養中、消化時間は長すぎるべきではなく、そうしないと細胞壁とその成長状態に影響を与える。

4.お客様は細胞を受け取ってから3日前に倍数ごとに何枚かの細胞写真を撮り、細胞状態を記録し、和技に便利であることを提案する

術部コミュニケーション輸送の原因で、個別の敏感細胞に不安定な状況が発生することがあります。直ちに私たちに連絡して、細胞の具体的な状況を詳しく知らせて、私たちの技術者が問題が解決されるまで追跡して、訪問してください。

会社が販売している製品：