魚脾臓リンパ球

魚脾臓リンパ球

|商品の属性：

|細胞紹介：

魚脾リンパは脾臓組織から分離し、脾臓は生体の大きな免疫器官であり、全身リンパ組織の総量を占める25%、大量のリンパ球とマクロファージを含み、生体細胞免疫と体液免疫の中心である。左季肋骨区の後外方肋骨弓の奥に位置し、9－11リブが対向し、長軸と第10肋骨が一致する。横隔膜は横隔膜筋と左肋骨横隔膜洞に隣接し、前方に胃があり、後方に左腎、左副腎に隣接し、下端に結腸脾溝に隣接し、柔軟な網状内皮細胞器官である。リンパ球（リンパ細胞）白血球の一種であり、リンパ器官から産生され、生体免疫応答機能の重要な細胞成分である。リンパ器官はその発生と機能の違いによって、中枢リンパ器官（別名プライマリリンパ器官）と周囲リンパ器官（別名セカンダリリンパ器官）の2種類に分けることができる。前者には胸腺、腔上嚢またはその相当器官が含まれる（哺乳動物では骨髄と考えられている）。抗原刺激を必要とせずにリンパ球を増殖させ、成熟したら周囲のリンパ器官に転送することができる。後者には脾臓、リンパ節などが含まれる。成熟リンパ球は抗原刺激に依存して分化増殖し、その後その免疫機能を発揮する必要がある。

|メソッドの概要：

実験室で分離された魚脾リンパは機械研磨法を用いて密度勾配遠心法を結合して製造され、細胞総量は約5×10⁵細胞/瓶。

|品質検査：

実験室で分離された魚脾リンパは検出され、含まれていなかったHIV-1、HBV の、HCV の、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌など。

|育成情報：

培地：含FBS の、ペニシリン、ストレプトミシン等

液交換頻度：毎2-31日1回液体を交換する

成長プロパティせいちょうぷろぱてぃ:懸濁けんだく

細胞形態：円形

継代プロパティ：増殖しない、継代しない

消化液：0.25%

培養条件：気相：空気、95%；二酸化炭素，5%

魚脾リンパ体外培養周期は有限である、この細胞の良い培養状態を保証するために、セットになった専用成長培地及び正しい操作方法を用いて培養することを提案する。

｜細胞培養操作：

1）蘇生細胞：細胞懸濁液を含む凍結貯蔵管を37℃の水浴中で急速に揺動解凍し、4 mL培地を加えて均一に混合した。1000 RPM条件下で4分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mL培地を補充した後、均等に吹き付けた。その後、すべての細胞懸濁液を一晩培養瓶に加えて培養した（または細胞懸濁液を10 cm皿に加え、約8 mlの培地を加え、一晩培養した）。翌日に液を交換し、細胞密度を検査した。

2）細胞継代：細胞密度が80〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.消化液1 ml（0.25%Trypsin-0.53 mM EDTA）を培養瓶に入れ、37℃培養箱に入れて1-2分間消化した後、顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、もし細胞の大部分が丸くなって脱落したら、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、少量の培地を加えて消化を停止した。

3.6-8 ml/瓶で培地を補充し、軽く均等にしてから吸引し、1000 RPM条件下で4分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mLの培養液を補充してから均等に吹き付ける。

4.細胞懸濁液を8 mlの培地を含む新しい皿または瓶に1：2の割合で分けた。

3）細胞凍結保存：細胞の成長状態が良好な場合、細胞凍結保存を行うことができる。次のT 25本はクラスです。

1.細胞が凍結保存された場合、培地を廃棄した後、PBS洗浄後に1 mlを添加し、細胞が丸くなって脱落した後、1 mlの血清含有培地を添加して消化を停止し、血球計数板を用いて計数することができる。

2.4 min 1000 rpm遠心分離により上清を除去した。1 mlの血清重懸濁細胞を加え、細胞数に応じて血清とDMSOを加え、軽く混合し、DMSO最終濃度は10%で、細胞密度は1 x 106/ml以上で、各凍結保存管は1 mlの細胞懸濁液を凍結保存し、凍結保存管に注意して標識をしっかりと行う。

3.凍結貯蔵管をプログラム冷却箱に入れ、−80度冷蔵庫に入れ、2時間後に液体窒素灌漑貯蔵に移す。次回取り出すために、チューブの凍結位置を記録します。

｜注意事項：

1.非赤系有核細胞を受け取った後、まず細胞瓶が完全かどうか、培養液の液漏れ、濁りなどの現象があるかどうかを観察し、もし上記の現象が発生したら、直ちに私たちに連絡してください。

2.細胞説明書をよく読み、細胞形態、使用培地、血清比率、必要なサイトカインなどの細胞関連情報を理解し、細胞培養条件*を確保する。培養条件が不*のために細胞に問題が発生した場合、責任はお客様自身が負う。

3.75%アルコールで細胞瓶表面を拭き、顕微鏡下で細胞状態を観察する。輸送問題で壁貼り細胞が瓶壁から少量脱落し、細胞を培養箱内に置いて4 ~ 6時間静置培養し、再び取り出して観察する。この時、多くの細胞は壁に貼り付けることができます。もし細胞が壁に貼り付けることができなければ、台望藍染色で細胞の活力を測定してください。もし細胞の活力が正常であることを証明すれば、細胞を遠心分離した後、新鮮な培地で再び壁に貼り付けて培養してください。染色の結果、細胞に活力がないことが明らかになったら、写真を撮ってすぐに連絡してください。情報が確認されたら、もう一度無料でお送りします。

4.細胞壁を静置した後、細胞瓶内の培地を逆さまにし、6 ~ 8 mL残して細胞の正常培養を維持し、ATCC CRL-1711（Sf 9）細胞の合流度が80%前後になると正常に継代してください。

5.顧客に細胞培養のために同じ条件の培地を使用してもらう。培養瓶内の余分な培地は収集して予備することができ、細胞の継代時に一定の割合で顧客が用意した培地と混合することができ、細胞を徐々に培養条件に適応させることができる。

6.お客様は細胞を受け取ってから3日前にそれぞれ何枚かの細胞写真を撮り、細胞状態を記録し、技術部とのコミュニケーションを容易にすることを提案する。輸送の原因で、個別の敏感細胞に不安定な状況が発生することがあります。直ちに私たちに連絡して、細胞の具体的な状況を知らせて、私たちの技術者が問題が解決するまで訪問を追跡するために。

7.この細胞は科学研究用にのみ使用される。

｜会社が販売している製品

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