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上海博耀生物科学技術有限公司(上海博耀商貿有限公司)
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ブタインターロイキン6(IL-6)定量検査キット
日付:2012-07-26読む:1

科学研究用のみ、医学診断に使用してはならない。

使用前にこの説明書をよく読んでください。

用いる 途(と) 豚の血清、血漿及び関連液体サンプルの定量検査に用いるしろメソゲン6(IL-6)の含有量。

動作原理

本キットは二部位サンドイッチ酵素結合免疫吸着法(酵素結合免疫吸着試験)、測定サンプル中ブタシロメチン6(IL-6)のレベルです。プリパック被ブタシロメチン6(IL-6)抗体の酵素標的孔への添加標準品、測定対象サンプルとHRPマークしろメソゲン6(IL-6)抗体、インキュベーションと洗浄を経て、結合していない成分を除去し、次に基質を添加するA.B、青色を生成し、そして酸の作用でzui終の黄色に転化する。色の濃淡とサンプル中ブタシロメチン6(IL-6)の濃度正の相関を呈する

キット組成

1

標準品(2000pg/ml

0.5ミリリットル

7

発色剤A.

6ミリリットル

2

標準品希釈液

6ミリリットル

8

発色剤B

6ミリリットル

3

酵素標準被覆板

12×8

9

ていしえき

6ミリリットル

4

酵素標準剤

6ミリリットル

10

取扱説明書

1

5

20×濃縮洗浄液

25ミリリットル

11

シーリングフィルム

2

6

サンプル希釈液

6ミリリットル

12

シール袋

1

注:標準品用標準品希釈液を順次希釈する:200010005002501250ピコ/ミリリットル

必要で提供されていない試薬や機材

1.37恒温箱

2.標準規格酵素スケール。

3.精密ピペット及び使い捨てピペット

4.蒸留水、

5.使い捨て試験管

6.サクションペーパ

注意事項

1.から2-8℃で取り出したキットは、キットを開く前に少なくとも室温バランス30分です。酵素標準バッグはプレートに開封された後、使い終わっていない場合は、プレートは密封袋に入れて保存しなければならない。

2.各ステップのサンプリングにはサンプリング装置を使用し、試験誤差を避けるためにその正確性を常に校正しなければならない

3.すべての標準品、サンプルをダブルチェックすることをお勧めします。

4.厳密に説明書の操作に従って行い、試験結果の判定は酵素標準器の示度を基準としなければならない.

5.交差汚染を避けるためには、手に持っている吸込口とシーリングフィルム

6.使用しない他の試薬は包装したり蓋をしたりしなければならない。異なるロット番号の試薬を混用しないでください。賞味期限前に使用する。

7.きばんB光に敏感で、長時間光にさらされないようにします。

プレート洗浄方法

手動で板を洗う方法:酵素標準板内の液体を振り切る、実験台の上に何層かの吸水紙を敷き、酵素スケール板を下に向けて何回か強くたたく。希釈後の洗浄液を少なくとも0.35ミリリットル穴に注入する1-2分です。必要に応じて、この手順を数回繰り返します。

自動洗濯板:自動洗濯機があれば、熟練してから正式な実験過程に使用する

サンプル要件

1検出できませんNaN3のサンプルNaN3ワサビペルオキシダーゼを抑制する(HRP)が活性である。

2標本採取後はできるだけ早く抽出を行い、抽出は関連文献に基づいて行い、抽出後はできるだけ早く実験を行うべきである。すぐに試験を行うことができなければ、標本を置く-20℃で保存するが、繰り返し凍結融解しないこと

オペレータプログラム

1.それぞれ空洞(空洞対照孔にサンプル及び酵素標準試薬を添加せず、残りの各工程の操作は同じ)、標準品孔、測定対象サンプル孔を設置する。酵素標準包被板上の標準品孔に標準品を入れる50μl;酵素標準被覆プレート上の測定対象サンプル孔にサンプル希釈液を先に添加する40μlを選択し、次に測定対象サンプルを追加します10μl(サンプルzui最終希釈度は5倍)。穴ごとに酵素標準剤を添加する50μl、空白穴を除く。軽く揺らして混ぜ、37℃温育60分です。

2.液体を捨て、乾燥し、穴ごとに希釈後の洗浄液を満タンにし、振動する30秒、洗浄液を振り切って、吸水紙でたたいて乾かす。缲り返して5回、撮って乾かす。

3.穴ごとに発色剤を先に入れるA50μl、さらに発色剤を加えるB50μl、軽く振動して均一にして、37℃遮光発色15.

4.酵素プレートを取り出し、穴ごとに終止液を加える50μl、反応を停止する(この時、青色は黄色に立転する)。

5.測定:空白穴でゼロに調整し、450ナノメートル波長で各孔の吸光度値(CD値)。 測定は終止液を加えた後15分以内に行います。

6.標準品の濃度及び対応するCD値から標準曲線の直線回帰方程式を算出し、サンプルのCD値は回帰方程式上で対応するサンプル濃度を算出する。様々なアプリケーションを使用して計算することもできます。サンプルが希釈されているため、その実際の濃度に総希釈倍数を乗じなければならないことを覚えておく必要があります。

操作手順のまとめ

試薬、サンプル、標準品を準備する

準備したサンプル、標準品、酵素標準試薬を加えて、37℃反応60

せんじょうばん5回、発色液を添加A.B37℃発色15

添加停止液

15分以内に読むCD

計算

検出範囲:31.2pg/ml-2000ピケ/ミリリットル

仕様: 96T

保存: 2-8

有効期間: 6ヶ月(2-8℃)。